hiv的检测

hiv的检测

流式细胞仪是检测CD4+T淋巴细胞计数的基础办法，能够得出CD4+T细胞占淋巴细胞的比值及肯定值。CD4+T细胞计数是艾滋病诊断、疾病分期的实验室基础指标(表1)。用于病毒载量的检测办法有转变录PCR、核酸序列扩增实验(NASBA)、分支DNA杂交实验(bDNA)等，其结局多用于监测HIV感化者的病程进度和抗病毒治疗结果。

对于未奉行抗病毒治疗的HIV感化者，最好在诊断为HIV感化时检测CD4+T淋巴细胞肯定值及病毒载量，明天每3～6个月检查CD4+T细胞计数，每3～4个月检测病毒载量，以有益临床医生定时把关HIV感化者和艾滋病人的疾病进度事端。

上算关注的是，由于分岐的血浆病毒载量检测办法结局有所差异，故在对同一病人奉行疾病进度考查及疗效估计时，最好在同一实验室采用同样的检测办法以有益对检测结局的分析。

hiv的检测－2．P24抗原和HIV核酸检测：HIV感化人体后有一段窗口期，旁边用于HIV抗体检测的第三代ELISA试剂窗口期为3～4周，在该期病毒抗体不能被检出，但可检测到病毒涉及抗原或离去出病毒，故在窗口期检测P24抗原是早期帮手诊断和进一步收紧窗口期的一种办法，还可用于HIV阳性母亲所生婴儿的早期帮手鉴别诊断。

HIV-1P24抗原检测普通用ELISA双抗体夹心法试剂(经SDA许可注册)，阳性结局必须经中和试验担任，该结局才可作为HIV感化的帮手诊断仿造。HIV-1P24抗原检测阴性，只表示在本试验中无看法，不能排除HIV感化。2．估价治疗结果：战胜的抗病毒治疗理应博得以下结果：血浆中HIV-RNA的水平4周内应下降1个Log以上，4～6个月内病毒降至检测不到的水平(HIVRNA<50拷贝/ml)，CD4+T淋巴细胞计数应逐渐攀升。要是达不到相应指标，则应根据实验室检测结局调整治疗运算。疾病进度的实验室监测：在HIV感化中，CD4+T淋巴细胞计数及血浆HIVRNA水平(病毒载量)能够为临床医生提供病人病毒水平、免疫形态的涉及材料，是预测疾病进度的可靠指标。这两项实验还可独立预测艾滋病临床过程和搁置期。

旁边抗体担任试验阳性是我国HIV感化诊断基础中不可欠妥的，不能仅凭临床晶莹示判断是否为HIV感化或艾滋病。

hiv的检测－抗病毒治疗的耐药监测：随着我国抗HIV治疗的展开，耐药性的监测越来越遭受重视。

HIV病毒耐药分为原发性(Primary)及继发性(Secondary)两种，前者指那些直接连累抗病毒药物作用靶点的变异，具有药物特异性，可降低抗病毒药物锐敏性；继发性变异又称为补偿变异，常露丑于原发性变异已存留的病毒基因组中，原发性变异可建设复制主要酶的急如雷电，导致病毒动力学的不利，继发性变异可纠正由原发性变异导致的不利，上扬病毒的耐药性，对原发性变异起到侵害和促进作用[2]。在HAART治疗中，病毒变异使得治疗的锐敏性下降，时时导致治疗败北。

hiv的检测－抗病毒治疗的疗效考查HIV抗体筛查呈阳性看法的标本由于存留假阳性的可能，必须做担任试验。

国际上有3种担任试验办法，包括免疫印迹试验、条带免疫试验及免疫荧光试验，旁边以免疫印迹试验最为常用。担任试剂必须经SDA注册许可。

免疫印迹试剂有HIV-1/2错位型和独一型，按《规范》乞求，普通先用HIV-1/2错位型试剂奉行检测，根据《规范》中判断免疫印迹试验结局的基本原则并对比所用试剂判别书概括判断：无HIV抗体特异带露丑的报告HIV抗体阴性；露丑HIV抗体特异带，合乎HIV-1抗体阳性判断基础，则报告HIV-1抗体阳性。如露丑HIV-2型的特异性条带，需用HIV-2型免疫印迹试剂再做独一的HIV-2型抗体担任试验，呈阴性看法，报告HIV-2抗体阴性；呈阳性看法的则报告HIV-2抗体血清学阳性，如需鉴别应奉行核酸序列分析。要是露丑HIV抗体特异带，但带型不够以判断为阳性，则判为HIV抗体不精确。对HIV抗体不精确者应按《规范》乞求奉行随访，需要时可做HIV-1P24抗原或核酸测量，但检测结局只能作为帮手诊断仿造，担任报告要仿造血清学随访结局。

由于旁边唾液检考验剂的锐敏性和尿液检考验剂的特异性触目低于血液检考验剂，故我国SDA已注册许可的HIV抗体筛查和担任试剂只能用于血液标本检测。

HIV感化的实验室检测在HIV感化的诊断、疾病进度的监测、抗病毒疗效考查和耐药性监测中至关粗笨。但HIV检测分岐于其它病原微生命检测，乞求十分严厉，任何错误的诊断，包括假阳性或假阴性，都会对被检者引发十分粗笨的连累。因此，HIV检测必须严厉相像国家定出的《艾滋病检测上班治理门径》和《艾滋病检测技术规范》(以下简称《规范》)奉行。

HIV感化的诊断hiv的检测－1．HIV抗体检测：旁边海外用于HIV抗体筛查的办法大多，根据检测原理分岐分为酶联免疫吸附法、凝集法和免疫层析法，可对血液、唾液和尿液标本奉行通例或火速检测。在实际上班中常用的有酶联免疫吸附试验(ELISA)、明胶凝集试验和各种火速诊断试剂。

自1985年第一代ELISA试剂问世以来，随着医学技术的飞跃进展，包被抗原已从第一代的全病毒裂解物进展为旁边以基因重组与多肽抗原包被和标志的有着良好锐敏性和特异性的第三代双抗原夹心试剂，检测亚型包括HIV-1、HIV-2和HIV-1型的O亚型，窗口期由10周收紧至3～4周。

为禁忌窗口期传染，荷兰、法国等国已研制出可同时检测抗原抗体的第四代ELISA筛查试剂，但其临床价值有待估计。

按《规范》乞求，我国采供血机构奉行血液筛查和各医疗卫生机构通例筛查检测宜同意ELISA法，自采自供血的单位必须奉行HIV抗体检测，在尚未创办艾滋病筛查实验室的偏僻区域或大医院急诊手术前可由经过培训的技术人员在规定的场所用火速检考验剂奉行血液筛查。

对用ELISA试剂或火速诊断试剂奉行的筛查实验如呈阴性看法，即报告HIV抗体阴性；对呈阳性看法的标本，筛查实验室采用原有试剂和另外一种分岐原理或分岐厂家的试剂奉行重复检测，如两种试剂复测均呈阴性看法，则报告HIV抗体阴性；如均呈阳性看法，或一阴一阳，需送艾滋病担任实验室奉行担任。

筛查试剂必须是HIV-1/2错位型、经国家药品监督治理局(SDA)注册许可、批检够格、临床估计质量优良、在管用期内的试剂。

3．调整用药仿造：为了守卫抗病毒治疗的结果，推迟耐药性引发，在奉行抗HIV治疗时，应定期奉行CD4+T细胞计数及病毒载量检测。

《运算》中规定，如露丑下列事端则应调整用药：⑴经HAART治疗8周后，血浆中病毒载量比原水平降低没有超脱1.0log；⑵经HAART治疗6个月后，血浆中病毒载量没有降至测不出的水平(<50拷贝数/ml)；⑶血浆中病毒载量经HAART治疗已博得测不出的水平后又露丑攀升，提醒露丑了耐药；⑷另外并发感化、疫苗接种、检测办法的急如雷电，血浆病毒载量从最低点攀升3倍或更高；⑸CD4+T细胞维持性缩减并露丑临床逆转。

旁边耐药性检测有两种办法，即表型检测及基因型检测。表型检测通过用药期间的病毒抚养奉行，而基因型检测则通过分子生命学办法检测与耐药性涉及的病毒基因骤变。

基因型检测的开销较低，技术也相对简易，可在样品搜罗后1～2过细手结局，但分析基因型耐药检测时，需要把关多数涉及知识，如骤变与抗病毒药物及其它药物的穿插耐药等，才能对结局奉行精确的分析。表型检测能够直接检测病毒的耐药性，但操作庞杂、耗时，技术乞求高，且异常昂贵，因此旁边国际上全面采用于临床的是基因型耐药检测。

1．治疗机会：在CDC于2002年定出的《艾滋病诊断与治疗指数运算》(以下简称《运算》)试行版中恰当规定，对急性感化期病人HIV血清阳转6个月之内和整体露丑艾滋病临床症状的患者应供应抗病毒治疗。对于无症状期感化者，其抗病毒治疗机会须对比CD4+T细胞计数及病毒载量概括判断。

HIV核酸检测，一般是检测HIVRNA，古昔只能定性检测血液中是否存留病毒核酸，而旁边的技术可定量检测血液中病毒复制水平。HIV核酸定性检测可用于HIV感化的帮手诊断，一般使用PCR或RT-PCR技术，使用分子生命学实验室通用的扩增试剂，引物可来自文献或自行设计，应勉力埋藏整体或习见的毒株，也可使用审核引物。

上算关注的是，HIV核酸定性检测阴性，只可报告本次实验结局阴性，但不能排除HIV感化；HIV核酸检测阳性，可作为诊断HIV感化的帮手指标，不能独个儿用于HIV感化的诊断，报告定性检测结局时还应表明看法条件和所使用的引物序列。

报告HIV核酸定量检测结局时应相像仪器读数报告结局，表明使用的试验办法、样品类型和样品量，当测量结局小于最低检测限时，应表明最低检测限水平，低于最低检测限的结局不能排除HIV感化。美国和西欧的研究报道，约5～16%的新感化者为HIV-1耐药株感化[3]。

徐军强等对16例我国HIV感化者奉行基因型耐药变异检测，仅得悉1例在HAART治疗前存留原发性耐药变异[4]，我们实验室对10例治疗前的我国HIV/AIDS患者奉行耐药检测，未得悉原发性变异，有3例存留蛋白酶区继发性变异，提醒我国绝大量数HIV/AIDS患者对HAART治疗结果理应是锐敏的。临床医生应规范治疗，定时检测CD4+T细胞及病毒载量变化。formattext(16);